Rosa de Bengala

Rosa de Bengala

(Antígeno Brucelar Amortiguado para el

Diagnóstico de Brucelosis)

Prueba de aglutinación rápida en placa para la detección temprana de aglutininas específicas de  Brucella 

(Brucella melitensis, abortus y suis). 

  

PRINCIPIO 

Se utiliza un antígeno de  Brucella abortus  biotipo 1 (cepa 99S o cepa 1119-3) acidificado regulado y teñido con Rosa de Bengala a un pH de 3.65 +/- 0.05 para la detección de aglutininas específicas de Brucella. Esta prueba puede  ser utilizada para un diagnóstico temprano.  

REACTIVOS 

g Rosa de Bengala  

g Control Positivo de Brucella  

g Control Negativo de Brucella  

ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS

El reactivo y los controles son estables de 275-281 °K (2-8°C) hasta sus respectivas fechas de caducidad. 

MATERIAL PROPORCIONADO 

a Placa de prueba. (Se recomienda que siempre se utilice una placa de vidrio para una mejor observación de los resultados).
a Pipetas desechables.
a El gotero incluido proporciona una gota de 30-40 µL.
a Se sugiere utilizar pipetas automáticas preferentemente. 

MATERIAL REQUERIDO (NO PROVISTO) 

a Cronómetro 

RECOLECCIÓN DE MUESTRA Y PREPARACIÓN 

Se recomienda que únicamente se utilice suero. Evite la hemólisis o lipemia de las muestras ya que esto puede interferir con los resultados. Conservar la muestra de    2-8°C (275-288 °K) si no se va a realizar el estudio en el momento.  

PROCEDIMIENTO 

1. Llevar a temperatura ambiente el reactivo, controles y muestras de suero. 

2. Utilizando la pipeta automática adicione 30 µL de la muestra del paciente en un círculo de la placa.
3. Mezcle suavemente el Antígeno Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogéneo, después coloque 30 µL en la placa de prueba, en el mismo círculo donde se colocó la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador. (Usar un aplicador diferente para cada muestra). Repita  este paso para cada muestra de paciente y controles.
4. Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos.
5. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado.

Importante: Después de este tiempo la lectura ya no es válida. 

RESULTADOS 

La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenzó a mezclar. Este es un tiempo límite óptimo en el que se da un espacio para la observación de ciertas aglutininas que se revelan lentamente y que de otra
manera se pueden omitir, además de que se pueden presentar reacciones no específicas.

No Aglutinación - Suero Negativo 
Cualquier cantidad de Aglutinación - Presencia de anticuerpos específicos. Suero Positivo 

Esta es sólo una prueba cualitativa de screening, la cual si resulta positiva debe ser confirmada mediante otra prueba cuantitativa para brucelosis como:
Aglutinación Lenta Estándar o Aglutinación Lenta en Presencia de                           2-Mercaptoetanol. 

NOTA: El aislamiento del agente etiológico mediante hemocultivos es de suma importancia.

 

e Paciente: Diana Elizabeth García Mendoza

e Resultado: Negativo ante la ausencia de una aglutinación

CONCLUSIÓN

Esta prueba nos es de gran ayuda para diferenciar y verificar el test de Brucella abortus dentro de las reacciones febriles, así reafirmando el diagnóstico para poder iniciar un tratamiento por Brucelosis

VDRL

VDRL

(ANTÍGENO DE CARDIOLIPINA PARA INVESTIGAR REAGINAS DE SÍFILIS EN SUERO SIN INACTIVAR, EN PLASMA Y L.C.R. (NO REQUIERE RECONSTITUCIÓN)

INTRODUCCIÓN

El diagnostico descansa en la serología; los métodos determinan dos clases de anticuerpos. 1) Tipo "CARDIOLIPINA" no treponema e inespecíficos y 2) Los antitreponemas especificados. La facilidad para su determinación ha hecho que los del tipo CARDIOLIPINA se utilicen universalmente en las exploraciones iniciales ya sean exámenes individuales o encuestas de población; la variante técnica más comúnmente empleada es la VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) que determina la floculación en placa (cuantitativa) del antígeno con CARDIOLIPINA y lecitina.

REACTIVOS Y MATERIAL

IAntígeno en suspensión estabilizado (VDRL).

IControl positivo.

IControl negativo.

IAguja No. 21 sin bisel.

IPipetas desechables.

IPlaca cóncava

IAgitador Mecánico

ICronometro.

IMicroscopio.

OBTENCIÓN DE LA MUESTRA.

b Obtener 3.0 ml de sangre por venopunción. 

b  Centrifugar y separar el suero.

  

MÉTODO

1. En una anillo de una placa cóncava depositar 0.05 ml de suero problema.

2. En anillos diferentes colocar una gota de gota control positivo y en otra por separado una gota de control negativo, extender sobre la superficie del anillo.

3. Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado previamente  resuspendido, en cada una de las muestras utilizando la aguja No. 21 sin bisel.

4. Colocar la placa sobre el agitador mecánico a 180 r.p.m. durante 4 minutos. Las pruebas realizadas en climas extremadamente secos pueden provocar la evaporación de las muestras, por lo tanto, la placa en rotación puede ser cubierta por una tapa de caja Petri húmeda previamente con una gasa.

5. Leer inmediatamente al microscopio con objetivo y ocular 10 X.

 

 

CONTROL POSITIVO

O Presencia de floculación mediana o grande.

CONTROL NEGATIVO

O Ausencia de floculación.

NOTA: El antígeno en suspensión debe estar a temperatura ambiente antes de utilizarse.

RESULTADOS

O Paciente: Daniel Calva Hernández

O Resultado: Negativo ante la ausencia de floculación 

CONCLUSIÓN

El VDRL es una prueba serológica realizada en medicina con sensibilidad y especificidad para complementar el diagnóstico de sífilis. Un VDRL positivo (reactivo), es un parámetro altamente sugestivo de sífilis, pero nunca sinónimo de ésta, por lo que debe evaluarse en combinación con la historia clínica del sujeto y sus antecedentes epidemiológicos. Cualquier enfermedad por treponemas causa un VDRL positivo: sífilis, frambesia, pinta, bejel, fiebre recurrente, leptospirosis, enfermedad de Lyme y otras borreliosis. Resultados reactivos también resultan con otras enfermedades infecciosas, como tuberculosis, lepra, neumococo, endocarditis infecciosa, mononucleosis infecciosa, neumonías virales, sarampión, varicela, paludismo y tripanosomiasis. El resultado no reactivo (negativo) tampoco descarta sífilis, porque durante el período de incubación de la enfermedad y hasta 15 días después de la aparición del chancro sifilítico, aún no se han producido anticuerpos.